PHI - Diabetes

Här kommer en intressant forskningsrapport. HoloMonitor vid diabetetsstudier. Mig veterligen är det första gången HoloMonitor använts i detta sammanhang. Hursom, det är en ny doktorsavhandling från Manchester Metropolitan University som nu förärar den tidigare doktorranden,Mohammed Subhan Asif, sin nya titel och en kul doktorshatt icke att förglömma (😁).

Forskningsrapporten får sägas är omfattande med sina 314 sidor och går verkligen på djupet med studier om hur en diabetesorsakad skada uppstår och varför kroppen har så svårt att läka den. Diabetes är ett välkänt ämne och nästan alla vet att det handlar om kroppens förmåga att producera insulin för att motverka alltför höga nivåer av glukos (blodsockret) som gör skada om det inte åtgärdas. En av de vanligare skadorna är sår som inte vill läka och i värsta fall leder till amputation. Ett litet sår på nån av fossingarna ska aldrig negligeras av den som har konstaterad diabetes. Så varför läker inte detta lilla sår frågar sig den drabbade ofta? Även behandlare ställer sig frågan ibland. I denna doktorsavhandling får vi svaret.För att detta inlägg inte ska bli alltför långt spolar jag fram till konstaterandet forskaren gjort att diabetes påverkar kroppens immunförsvar. Dvs cellers förmåga att attackera och läka skador. Studierna fokuserar just på sårläkningsprocessen (Wound healing) där många svar erhålls.

Forskaren ifråga har använt sig av HoloMonitor och appen Wound Healing assay. Flitigt ska sägas. 
I x antal scenarion/händelser får han svar av appen. Svar som ger nästa steg i studierna osv osv....

Här nedan tar jag upp ett urval av användandet. (studien har 32 hänvisningar till HoloMonitor och mjukvaran).

The Effect of MGN3 on In Vitro Models of Diabetic Impaired Wound Healing

A thesis submitted in partial fulfilment of the requirements of Manchester Metropolitan University for the degree of Doctor of Philosophy 

 Mohammed Subhan Asif Department of Life Sciences Manchester Metropolitan University 2025

Urval:

2.2.9 Wound Healing (Cell Exclusion) Assay 
HDF fibroblasts and keratinocytes (5 × 10⁴ cells/mL) were cultured in cell exclusion inserts within 24-well plates at glucose concentrations of 11, 20, and 30mM. Fibroblasts were incubated for 4 days, and keratinocytes for 3 days, at 37 °C with 5% CO₂. This allowed for the formation of an empty fixed cell exclusion zone (gap width 500µm) within the lawn of cultured fibroblasts and keratinocytes in each well through which the cells could later migrate and proliferate into following removal of the inserts. After incubation the cell-exclusion inserts were removed, creating a defined 500μm-wide gap (‘wound’) in the monolayer. Fibroblasts were washed twice with DPBS before treatment (n=3) with or without LPS (5μg/mL) or MGN3 (2mg/mL), then placed on the Phase Holographic Imaging (Phiab) Holomonitor live-cell imaging system, housed in a standard 5% CO₂ incubator at 37 °C for 60 hours. Images across the wound (n=12) were captured every hour and individually analysed using the Holomonitor software to generate percentage wound closure graphs and perform data analysis. The same procedure was applied to keratinocytes after treatments and the keratinocytes were imaged using the Holomonitor system under identical incubator conditions for 24 hours. Images (n=12) were captured every 45 minutes and analysed to assess wound closure over time.

5.3.2 Wound Healing Assay
 Fibroblasts were imaged every 45 minutes for 60 hours and keratinocytes every 1 hour for 24 hours using a Holomonitor live-cell imaging system. Wound closure was quantified from 12 images per well. 

Figure 5. 12: The Effect of Mitomycin C on Fibroblast ‘Wound’ Closure at 11mM Glucose. HDFs were cultured with 11mM glucose, treated with LPS (5ug/ml) or MGN3 (2mg/ml) and Mitomycin C (MC) and incubated for 60 hours on a Holomonitor microscope. Images shown represent different time points (0, 36 and 60 hours). Panel A show untreated fibroblasts + MC, Panel B are fibroblasts treated with LPS + MC and Panel C shows fibroblasts treated with MGN3 + MC.

Figure 5. 36: The Effect of Cytochalasin D on Keratinocyte ‘Wound’ Closure after at 11mM Glucose. HACATs were cultured with 11mM glucose, treated with LPS (5ug/ml) or MGN3 (2mg/ml) and Cytochalasin D (CytoD) and incubated for 24 hours on a Holomonitor microscope. Images shown represent different time points (0, 12 and 24 hours). Panel A show untreated keratinocytes + CytoD, Panel B are keratinocytes treated with LPS + CytoD and Panel C shows keratinocytes treated with MGN3 + CytoD.

Min kommentar
Den här studien är såpass omfattande och ger så många nya svar så doktorshatten till forskaren är mer än välförtjänt. Stort + i kanten till HoloMonitor som bidragit med dessa nya insikter till fromma för världens alla diabetesdrabbade.

                                          Mvh the99

Som service till alla HoloMonitornyfikna forskare : HoloMonitor Demo

Bonus: Även denna aktuella studie,tyvärr hårt inlåst,ser ut att innehålla användande av HoloMonitor och appen Wound healing assay.