HoloMonitor i Nature

Published: 28 March 2019

Effects of GADL1 overexpression on cell migration and the associated morphological changes

 Abstract
Lithium has been used for maintenance treatment of bipolar disorder, but drug response varies among patients. Single-nucleotide polymorphisms in glutamate decarboxylase–like protein 1 (GADL1) are found to be associated with lithium response in Han Chinese bipolar patients. In this study, we assessed GADL1 function using a neuroblastoma cell line that stably overexpressed GADL1. Genes encoding factors involved in cell migration, such as FN1, ITGA2, ITGAV and CCL2, were downregulated in GADL1-overexpressing cells. GADL1 overexpression indeed suppressed cell migration. Cell migration speed and perimeter length exhibited similar trends, both of which were decreased under GADL1 overexpression or lithium treatment but increased upon stimulation with CCL2. Secreted GADL1 or its enzyme product, taurine, in the conditioned medium might exert only mild effects on the observed changes. Compared with SH-SY5Y cells, GADL1-overexpressing cells were much more sensitive to CCL2 treatment but less sensitive to lithium, indicating that the level of GADL1 expression can affect cell sensitivity to lithium or  CCL2 treatment. Together, these results suggest that cell migration and related morphological changes might provide good indicators of the sensitivity toward lithium treatment, and the GADL1 stable overexpression cell line might serve as a useful platform to screen novel therapeutics for bipolar disorder.

Methods

Digital holographic imaging

Cell migration distance and morphological changes of cells including cell area, thickness, volume, perimeter length, irregularity, and eccentricity were measured using real-time, three-dimensional holographic imaging (HoloMonitor M4; Phase Holographic Imaging, Sweden).
SH-SY5Y or GADL1-overexpressing cells were seeded at 3 × 10⁵ cells/well on a laminin-coated 6-well plate (Corning, USA) and maintained in DMEM/F12 (1:1) with 3% FBS inside an incubator at 37 °C in 5% CO₂. At 4–5 h after plating cells, lithium chloride (1 or 20 mM, Sigma Aldrich, USA) or CCL2 (25 or 50 ng/ml, R&D Systems, USA) was added to the cells for 48 or 72 h, respectively. Images were acquired at 20-min intervals for 48–72 h.
The images were analyzed using Hstudio software (Phase Holographic Imaging). The dose of 20 mM lithium used in the experiment was based on a previous study showing that, at this dose, lithium activated MAPK and inhibited GSK-3β in SH-SY5Y cells, with no evidence of cytotoxicity.
Besides, 20 mM lithium treatment resulted in an intracellular lithium concentration of 3.2 ± 0.2 mM as measured by a previous study.


Min kommentar
Är att jag inte ger en kommentar. Varför? Jo,orkar inte traggla mig igenom rapporten. Är låg idag.
Var hos hudläkarspecialist igår och man hittade nytt skit. En basaliomcancer som omedelbart togs bort och 2 nya "fynd" som ska hållas under observation tills vidare. Faaaaan vad jag är trött på detta jävla elände.

Edit 31/3
I utbildningssyfte (galghumor) tänkte jag visa hur en basaliomcancer på bröstkorgen ser ut efter ha borttagits med frysbehandling via flytande kväve ( minus 200 grader ). Ja, det är min "basse" 4 dagar efter borttagning.
Storlek ungefär som en gammal 1 krona, men nu har den minskat i size mot hur det såg ut i onsdags kväll.

Detta var alltså ett exempel på hur man tar bort detta elände innan den har hunnit sprida sig och hitta på annat skit. För 1 år sen när jag tog bort den första hudcancern opererade man bort den vilket gav osnygga stygn och ärrbildning efteråt. Sen finns det andra sätt att ta bort eländet. De vanligaste är då  1.strålbehandling, 2.skrapa och bränna som innebär att man under lokalbedövning skrapar bort basaliomet och sen med elström bränner bort ev cancerrester, sen har vi 3.PDT som även kallas Fotodynamisk terapi.
Sådär, nu har ni byggt på er kunskap ytterligare. Jag behöver väl inte nämna att om nån av er läsare ser nån "konstig" pryl på huden så är det bara att boka tid hos husläkaren pronto och kolla upp vad det kan vara.
Better safe than sorry.
Nåväl, denna utvikning får bli en brygga till nästa inlägg som kommer under kvällen.


                            Fuck cancer !!!

Tack Axel för att du uppmärksammade bloggen på denna Naturepublikation.